系統泵
標配的兩個(gè)系統泵基于專(zhuān)為第三代PPS 蛋白純化系統開(kāi)發(fā)的先進(jìn)技術(shù)打造。堅固的結構可在低反壓和高反壓下提供可重現的流速,從而縮短分離時(shí)間。
每個(gè)泵由一對泵頭組成,向混合器輸送低脈沖液流。所產(chǎn)生的連續且精確的液流能夠實(shí)現可重現的等度或梯度洗脫。對于PPS-10HD,系統泵在 200 bar (2900 psi, 20 MPa) 的最大工作壓力下提供最高可達 10mL/min的流速范圍。對于 PPS-100HD,在 100bar(1450psi,10MPa) 的最大工作壓力下,流速最高可達 100 mL/min。對于 PPS-PilotHD,在 20 bar (290 psi,2 MPa) 的最大工作壓力下,流速最高可達 400 mL/min。連接到泵上的系統壓力檢測器,可連續測量系統壓力,并自動(dòng)調節流速,以避免達到設定的壓力極限。
混合器
混合器保證了梯度運行期間實(shí)現均勻的緩沖液混合?;旌铣厝莘e的選擇取決于流速和所用的緩沖液類(lèi)型。對于較高的流速或難以混合的緩沖液,可更換較大的混合池容積。PPS-10HD標配1 mL,選配2 mL混合池;PPS-100HD標配2mL,選配5 mL混合池;PPS-PilotHD標配5 mL混合池,其他容積可定制。
進(jìn)樣閥
新型的閥門(mén)設計無(wú)需更改管路連接,即可在各種進(jìn)樣方式之間進(jìn)行轉換。進(jìn)樣閥通過(guò)軟件控制可實(shí)現自動(dòng)切換載樣、進(jìn)樣和沖洗三個(gè)狀態(tài),支持定量進(jìn)樣。PPS-HD 系統標配了一個(gè)容積為 2ml 的樣品環(huán)。
PPS-10HD 、PPS-100HD 和 PPS-PilotHD 的進(jìn)樣閥 lnj-HD 兼容多種進(jìn)樣方式:
用注射器將樣品手動(dòng)裝載至樣品環(huán)或者定量杯
用選配的樣品泵將樣品裝載至樣品環(huán)和定量杯
用選配的樣品泵將樣品直接上樣至層析柱中
紫外檢測器
PPS-HD 配備了固定波長(cháng)紫外檢測器或可變多波長(cháng)紫外與可見(jiàn)光檢測器。
固定波長(cháng) (280 nm) 紫外檢測器 DET-HD-L采用 LED技術(shù),耐用、可靠,開(kāi)機即用。紫外檢測器DET-HD-L的設計可有效防止樣品受熱。該檢測器提供標準的 2mm流通池 ( 標配) ,當需要更高靈敏度的測量時(shí),可選配的 5 mm 流通池。對于 DET-HD-L 檢測器,燈的工作時(shí)間至少為 10000 小時(shí)。
紫外檢測器DET-HD-M用于在 200至 400nm的紫外區域進(jìn)行多波長(cháng)檢測,并可擴展成200-800nm的紫外與可見(jiàn)光區域進(jìn)行多波長(cháng)檢測。紫外檢測器DET-HD-M可同時(shí)檢測多達三種波長(cháng)。雙光路光纖光譜設計有效消除了環(huán)境對檢測的影響,降低噪聲和漂移。固定光柵結構增加了波長(cháng)準確度和重復性。為了在純化不同蛋白質(zhì)濃度的樣品時(shí)優(yōu)化性能,有兩種流通池光徑長(cháng)度可供選擇:2mm ( 標配) 和 5mm。流通池設計,加上光纖技術(shù),提供了高信噪比,不會(huì )引起紫外流通池的局部加熱。該檢測器至少包含一個(gè)氘燈,工作時(shí)間至少為 2000小時(shí),開(kāi)機即用。每次打開(kāi)儀器,檢測器都會(huì )進(jìn)行自動(dòng)校準。所有 DET-HD-M 紫外流通池在出廠(chǎng)時(shí)都經(jīng)過(guò)校準。
多波長(cháng)檢測器可用于檢測污染物,特別是標記的蛋白質(zhì),或在 280nm下沒(méi)有吸收值的目標分子。圖 4顯示了 DET-HD-M用多種波長(cháng)進(jìn)行梯度檢測的精確性。在 254、265 和 280nm波長(cháng)下檢測不同濃度丙酮溶液的吸光度值,計算結果表明,多種波長(cháng)檢測的精度可以極好的滿(mǎn)足蛋白質(zhì)分離純化過(guò)程中,對不同組分或污染物的檢測需求。
圖 4. DET-HD-M梯度吸光度值的檢測
電導率檢測器
電導率檢測器測量緩沖液和樣品的電導率,以便在線(xiàn)檢測真實(shí)梯度。集成的溫度傳感器可校正由溫度引起的電導率變化。電導率檢測器的讀值范圍0.00-1000.00ms/cm,因此能夠在不同的層析技術(shù)中檢測電導率。
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